酸性磷酸酶(ACP)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 微量法
測(cè)定規(guī)格: 100T/48S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無(wú)機(jī)磷酸,常見(jiàn)于巨噬細(xì)胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于的輔助診斷。
測(cè)定原理:
在酸性環(huán)境中,ACP催化對(duì)硝基苯磷酸二鈉水解生成4-硝基苯酚,在405nm有特征光吸收;通過(guò)測(cè)定405nm吸光度增加速率,來(lái)計(jì)算ACP活性。
自備儀器和用品:
酶標(biāo)儀、96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器和蒸餾水。
粗酶液提取:
1.組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1 mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,4℃、10000g離心10 min,取上清液待測(cè)。
2.或細(xì)胞:按照或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1 mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3 min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測(cè)。
3.血液可直接測(cè)定,或者適當(dāng)稀釋后測(cè)定。