Na+k+ ——ATP酶測試盒
測定方法: 分光光度法
測定規(guī)格: 50管/24樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意 : 正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
Na+K+- ATP酶廣泛分布于植物、動物、微生物和細胞中,可催化ATP水解生成ADP和無機磷。
測定原理:
Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無機磷,通過測定無機磷的量來確定ATP酶活性。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液: 液體50mL ×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 10mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 5mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 5ml×1 瓶,4℃保存。
試劑四:粉劑×3 支,-20℃保存。用時每支加1mL蒸餾水,現(xiàn)用現(xiàn)配;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑五:液體 5mL×1 瓶,4℃保存。
試劑六:粉劑×1瓶,4℃保存。用時加入3mL蒸餾水, 4℃保存。
試劑七:粉劑×1瓶, 4℃保存。用時加入25mL蒸餾水,溶解后4℃保存一周。
試劑八:粉劑×1瓶, 4℃保存。用時加入25mL蒸餾水,溶解后4℃保存一周。
試劑九:液體25mL×1 瓶,室溫保存。
試劑十:10mmol/L 標(biāo)準(zhǔn)磷貯備液 10mL×1 瓶,4℃保存。
0.5μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)磷應(yīng)用液配制:將試劑十 20倍稀釋,即取 0.1mL試劑十加1.9mL蒸餾水充分混勻。
定磷劑的配制:按H2O: 試劑七:試劑八:試劑九=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷劑應(yīng)為淺黃色。若無色則試劑失效,若是藍色則為磷污染,定磷劑現(xiàn)用現(xiàn)配。
注意:配試劑 用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。